サザンブロッティング
記事の医療専門家
アレクセイ・クリヴェンコ、医療評論家
最後に見直したもの: 05.07.2025
最後に見直したもの: 05.07.2025
サザンブロッティング(1975年にE. サザンとR. デイビスによって開発)は、現在、特定の疾患の遺伝子を同定するために主に用いられている手法です。この手法では、患者の細胞からDNAを抽出し、1種類以上の制限酵素で処理します。得られた断片を電気泳動にかけ、サイズによって分離します(小さな断片ほどゲルの細孔をより速く通過します)。次に、断片をニトロセルロースフィルターに転写(リプリント)し、その上に放射性標識プローブを重ねます。プローブは相補的な配列にのみ結合します。次に、オートラジオグラフィーを用いて、電気泳動図上で目的のゲノムDNA断片の位置を決定します。
予備的な制限および電気泳動を行わずに固体マトリックス上に滴下した DNA または RNA 調製物の標識 DNA プローブによるハイブリダイゼーションは、フィルター上の DNA スポットの構成 (それぞれ丸型または長方形) に応じて、ドット ハイブリダイゼーションまたはスロット ハイブリダイゼーションと呼ばれます。