脳脊髄液の微生物学的分析

微生物学的研究

髄液の染色塗抹標本の顕微鏡検査により、細菌性髄膜炎患者の10～20%で微生物叢を同定できます。細菌性髄膜炎では、好中球の細胞質内に豆のような形をした髄膜双球菌、または同じく双球菌だが三角形をしており、一対の球菌が菱形（細胞外に莢膜で覆われている）を形成する肺炎球菌が検出されます。スピロヘータ、桿菌、酵母様真菌細胞が肉眼で検出される場合もあります。顕微鏡検査で得られたデータは概算であり、他の方法で確認します。結核菌の検出には浮遊法が用いられます。病原菌の培養物を分離するには、髄液を栄養培地に播種します。検査結果は、脳脊髄液の適切な採取と輸送、そして培養液の質に左右されます。患者が脊髄穿刺前に抗菌薬を投与されていない場合、病原体培養の分離頻度は2倍高くなります。実際には、化膿性髄膜炎患者の30～50%で脳脊髄液から病原体培養を分離することが可能です。分離培養物の髄膜炎治療に使用される抗菌薬（ベンジルペニシリン、アンピシリン、オキサシリン、セフトリアキソン、ペフロキサシン、シプロフロキサシン、バンコマイシン、リファンピシン、ゲンタマイシン）に対する感受性の検査は必須です。真菌培養物は、抗真菌薬に対する感受性を検査します。

脳脊髄液の微生物学的検査における基本原則は、増殖するコロニー数は、播種した微生物の数と、播種時の生存率に依存するというものです。つまり、微生物学的検査に供する脳脊髄液の量と採取速度は、検査結果に直接影響を及ぼします。特に真菌感染症の場合は、髄液中の真菌濃度が極めて低いため、大量の髄液を播種に供する必要があります。したがって、慢性髄膜炎の患者を検査する場合、播種に供する髄液の最小量は15～20 mlとする必要があります。微生物学的検査のもう一つの原則は、急性細菌性髄膜炎において必須のグラム染色です。染色手順は約5分かかり、高い感度と特異性を備えています。この染色結果に基づいて、適切な抗菌療法を迅速に選択することができます。腰椎穿刺前に投与された抗生物質は細菌膜を損傷し、グラム染色の特異性を著しく低下させる可能性があるが、それでもグラム染色は有用である。培養、グラム染色、結核菌染色、クリプトコッカスに対する墨汁染色に加え、ウイルス、細菌、真菌抗原に対する血清学的検査が数多く用いられる。したがって、神経梅毒が疑われる場合は、髄液（CSF）とRIF（腎盂腎炎ウイルス）を検査する必要がある。

ウイルス学的方法

ウイルス培養の分離は通常、科学的な目的にのみ使用されます。

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