血中のビタミンA

血清中のビタミン A (レチノール) 濃度の基準値 (標準値): 1 ～ 6 歳の小児 - 0.7 ～ 1.5 μmol/l、7 ～ 12 歳の小児 - 0.91 ～ 1.71 μmol/l、13 ～ 19 歳の小児 - 0.91 ～ 2.51 μmol/l、成人 - 1.05 ～ 2.09 μmol/l。

ビタミン A は脂溶性ビタミンで、ビタミン A そのもの、またはレチノール（動物性食品にのみ含まれる）と、消化管の壁でレチノールに変換されるカロチンとして知られるプロビタミン A（動物性および植物性食品に由来）の 2 つの形で存在します。食物中のレチノールの約 50～90% は小腸で吸収され、カイロミクロンに結合した複合体で肝臓に輸送され、そこでレチノールパルミテートとして蓄えられます。必要に応じて、ビタミン A 結合タンパク質と複合体を形成したレチノールとして血流に放出されます。血清中では、ビタミン A 結合タンパク質 + レチノール複合体がトランスサイレチンに結合します。血清から、レチノールは網膜や上皮の光受容体などの標的細胞に取り込まれます。

体が必要量（年齢、性別、生理状態に応じて1日あたり180～430マイクログラムのレチノール）を超えるビタミンAを摂取すると、その過剰分は肝臓に蓄積され、ビタミンAの貯蔵庫が形成されます。食事によるレチノールの摂取量が減少すると、肝臓に蓄えられたレチノールが血流に放出され、血清中のレチノール濃度が正常値（0.7マイクロモル/リットル以上）に維持されます。ビタミンAの他の生理活性型（レチナールおよびレチノイン酸）は、血中濃度が非常に低く（0.35マイクロモル/リットル未満）、レチノールエステルはビタミンA総量の約5%（0.1～0.17マイクロモル/リットル）を占めます。

ビタミンAは酸化還元プロセスにおいて重要な役割を果たします。レチノールは、肝臓と筋肉におけるグリコーゲンの生成を促進し、血中コレステロール濃度の増加を助け、ステロイドホルモンと性ホルモンの合成に関与します。骨格系の成長と形成、ロドプシンの再合成に必要であり、また、粘膜と皮膚の表皮の正常な機能を促進し、化生、角質増殖、過剰な脱落を防ぎます。ビタミンAは、髪、歯、歯茎の強化に役立ちます。近年、ビタミンAが癌の予防や免疫調節において多様な役割を果たすことが示されています（貪食作用の完了に必要、免疫グロブリン合成の増加、TキラーT細胞の形成刺激、II型TヘルパーT細胞の刺激など）。ビタミンAは活性抗酸化物質であり、主にビタミンEの存在下で作用し、ビタミンCの酸化を防ぎます。ビタミンA欠乏症は悪性腫瘍の危険因子と考えられています。実験研究では、食事中のビタミンA含有量を増やすと、平均寿命が17.5%延びることが示されています。亜鉛はビタミンAの代謝に不可欠な補因子であり、ビタミンA結合タンパク質の合成に不可欠です。

成人（20〜50歳）のレチノールの1日の平均必要量は1.2 mg（4000 IU、1 IUはレチノール0.3 mcgに相当）で、妊婦は1.5 mg（5000 IU）、授乳中の女性は1.8 mg（6000 IU）、60歳以上の人は2.5 mg（10,000 IU）です。レチノールの1日必要量の少なくとも3分の1は、完成した形で体に供給する必要があります。残りは、体内でレチノールが形成されるカロテノイドを摂取することでカバーできます。食品中のレチノールの約30％は加熱処理中に破壊されることに留意する必要があります。レチノールの活性はカロチンの2倍高く、さらに後者の腸で吸収されるのは30〜40％だけです。したがって、食事を評価する場合、レチノール 1 mg はカロテノイド 6 mg にほぼ相当すると考えられます。

LAアニシモワによるベッセイ法の改良法による血清中のレチノール（ビタミンA）およびカロテノイドの測定

方法の原理

ビタミン A とカロテノイドの測定は、アルカリ性アルコール溶液で加水分解し、続いて有機溶媒の混合物で抽出することによって行われます。

試薬

• 11 M水酸化カリウム（KOH）溶液。
• エチルアルコール96％。
• 1M水酸化カリウム（KOH）96%エチルアルコール溶液：11M KOH溶液1容量を96%エチルアルコール10容量と混合する。試薬は試験当日に調製する。混合中に着色が生じた場合は、使用前にアルコールを蒸留精製する必要がある。
• 化学的に純粋なキシレン
• オクタン、化学的に純粋
• キシレン・オクタン混合物：キシレンとオクタンを等量混合して製造します。

研究は分光光度計を使用して行われます。

ビタミンAの測定方法

指から採取した血液（約1ml）を遠心管に入れ、ガラスカップに入れた温水（40～45℃）に20～30分間浸漬します。血清を分離するために、細いガラス棒で血栓を管壁の縁に沿って慎重に引き寄せ、3000rpmで10分間遠心分離します。

血清0.12 mLを採取し、凝集管に移し、1 M水酸化カリウムアルコール溶液0.12 mLを加え、内容物をよく振盪する。

サンプルの入った試験管を 60 ℃ の水浴に 20 分間置いて加水分解を行います。

サンプルを冷却し、キシレン-オクタン混合液0.12 mlを加え、10～15秒間激しく振盪する。再度冷却し、遠心分離する。

ビタミン A とカロテノイドを含む上層を、ゴム球付きのパスツールピペットを使用して慎重に取り除き、マイクロキュベットに移します。

サンプルは、ビタミン A を決定するために 328 nm の波長で分光光度計で測定され、カロテノイドを決定するために 460 nm の波長で測定されます。

分光光度計による測定後、サンプルは紫外線に曝露され、ビタミン A が破壊されます。このために、液体で満たされたキュベットの部分が放射線に曝露されるように、マイクロキュベットから 15 ～ 20 cm の距離に石英 (殺菌) ランプが設置されます。照射時間は 45 ～ 60 分です。

サンプルは328 nmの波長で再度分光光度計で測定され、ビタミンA含有量は、ベッセイがビタミンAについて算出した係数637を考慮した吸光値（光学密度）の差から算出されます。

計算は次の式に従って実行されます。

X = 637 × (E328(1) - E328(2))、

ここで、XはビタミンAの含有量（μg/dl）、637はビタミンAを決定するためにベッセイが算出した係数、E328（1）は照射前の溶液の光学密度、E328（2）は照射後の溶液の光学密度である。

ビタミン A 濃度を µg/dL から µmol/L に変換する係数は 0.035 です。

カロテノイドの含有量は次の式で計算されます。

X = 480-E480,

ここで、X はカロテノイド含有量 (μg/dl)、480 はカロテノイドを決定するために Bessey によって計算された係数、E480 は試験溶液の光学密度です。

注記

ベッシー氏によれば、研究を行う際には血清の量を増減することができますが、アルコール溶液の量に対する血清の比率はキシレンオクタン混合物の量の変化に応じて一定でなければなりません。

血清中のビタミンAの正常値は、新生児および乳児で160～270μg/l、成人で1.05～2.45μmol/l（300～700μg/l）です。成人の血清中のカロテノイド含有量は800～2300μg/lです。